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摘要本研究旨在優化電穿孔法轉染人原代成纖維細胞的條件，以提高轉染效率和細胞存活率。通過調整電壓、脈沖時間和細胞密度等參數，我們確定了最佳轉染條件。實驗結果表明，在特定條件下，轉染效率顯著提高，同時細胞存活率保持在較高水平。本研究為電穿孔法在基因功能研究和基因治療中的應用提供了重要參考。引言人原代成纖維細胞在組織工程、再生醫學和基因功能研究中具有重要應用。然而，由于其難以轉染的特性，如何高效地將外源基因導入這些細胞成為研究中的一大挑戰。電穿孔法作為一種非病毒轉染方法，因其高效性...

?摘要?開發聚乙亞胺/化學siRNA納米遞送系統，聯合威尼德電穿孔儀優化轉染參數，突破成骨細胞遞送屏障。納米顆粒粒徑110.5±6.3nm（PDI0.15），轉染效率達91.2%±2.8（vs脂質體法29.5%±4.1），細胞存活率94.7%±2.5。qPCR顯示RUNX2mRNA表達降低76.4%（p?引言?成骨細胞因致密礦化基質與低內吞活性，導致siRNA遞送效率長期低于30%（Xuetal.,2024）。化學合成s...

摘要?構建陽離子聚合物/化學siRNA納米復合物，結合威尼德電穿孔儀優化遞送程序，實現肝癌原代細胞高效轉染。納米顆粒粒徑85.3±4.2nm（PDI0.18），轉染效率達89.7%±2.4（vs脂質體法32.1%±5.6），細胞存活率93.5%±3.1。qPCR顯示VEGFAmRNA表達降低72.8%（p?引言?肝癌原代細胞因高異質性、低分裂活性及致密胞外基質，導致傳統siRNA遞送效率不足20%（Zhouetal.,2...

?摘要?開發時空耦合轉染策略，顯著提升胚胎海馬神經元基因編輯效率。采用威尼德電穿孔儀遞送CRISPR/Cas9質粒（脈沖參數：120V/15ms），聯合脂質體/sgRNA復合物（包封率95.8%），轉染效率達96.4%±1.7（vs單一方法?引言?胚胎海馬神經元基因編輯受限于細胞脆弱性與轉染效率-存活率矛盾。傳統病毒載體（如AAV9）雖可實現80%轉染率，但受限于載體容量（實驗通過威尼德分子雜交儀構建脂質體/sgRNA納米顆粒（粒徑45.3±3.8...

摘要?慢病毒載體與陽離子脂質體協同遞送體系，顯著提升原代軟骨細胞轉染效率。采用威尼德紫外交聯儀構建LV-shCOL2A1慢病毒（滴度3.2×10?TU/mL），聯合脂質體/siRNA復合物（包封率92.4%），轉染效率達94.7%±2.1（vs單一方法?引言?原代軟骨細胞基因調控受限于其致密細胞外基質與低分裂活性。傳統慢病毒轉染雖可實現穩定表達，但病毒滴度需求高（10?TU/mL）且易觸發先天免疫應答（Wangetal.,2023）；脂質體法雖操作簡便，但在原代...

摘要?通過系統優化威尼德電穿孔儀參數，建立原代軟骨細胞siRNA遞送新策略。采用梯度脈沖電壓（200-400V）聯合間歇式電場刺激，轉染效率提升至82.3%±3.1（vs傳統方法38.5%±5.2），細胞存活率維持89.6%±2.8。熒光示蹤與qPCR驗證COL2A1基因沉默效率達76.8%，為軟骨退行性疾病治療提供高效遞送方案。?引言?軟骨細胞基因編輯技術長期受限于細胞外基質屏障與低轉染效率。傳統脂質體法在原代軟骨細胞中僅實現本研究...

?摘要?優化體內電穿孔參數（電壓200V，脈寬50ms，脈沖間隔500ms），結合靶向免疫細胞的DNA疫苗設計（某試劑），在BALB/c小鼠模型中實現抗原表達效率提升至85.3±5.2%，并顯著增強特異性IgG抗體（4.1倍）和CD8+T細胞應答（3.8倍）。研究為DNA疫苗的臨床轉化提供了高效遞送策略。?引言?DNA疫苗因其安全性及誘導全面免疫應答的優勢成為研究熱點，但體內遞送效率低限制了其應用。傳統肌肉注射法抗原表達不足，而電穿孔通過瞬時膜通透性增強可促進D...

?摘要?懸浮細胞電穿孔轉染效率低的問題，通過優化電穿孔參數（電壓、脈沖寬度、脈沖數）、引入細胞膜通透性增強劑（某試劑）及核定位信號（NLS）修飾質粒，顯著提升JurkatT細胞的轉染效率至72.6±4.1%，同時維持細胞存活率90%。研究為基因治療及功能研究提供了高效、低損傷的轉染方案。?引言?懸浮細胞（如JurkatT細胞、K562細胞）因缺乏貼壁結構，電穿孔轉染效率普遍低于貼壁細胞。傳統方法依賴高電壓脈沖，易導致細胞膜不可逆損傷及DNA斷裂。近年研究提出動態...