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  • 2022

    7-23

    Q1:PVDF膜和硝酸膜結合蛋白的原理是什么?A1:一般而言,硝酸纖維素膜是通過疏水作用來和蛋白質相聯,若反復洗幾次后,蛋白容易掉下來,效果較差。尼龍膜主要通過它膜上的正電荷和蛋白接合(注:常用的PVDF膜即帶正電荷的尼龍膜),同時也有疏水作用,但相對較弱。這樣的話,PVDF膜和蛋白接合較牢,不易脫落,效果較好。Q2:做組織樣品的westernblot的時候,處理樣品有什么訣竅?A2:必須進行研磨、勻漿、超聲處理,蛋白質溶解度會更好,離心要充分,膜蛋白需用更劇烈的方法抽提,低...

  • 2022

    7-23

    經典實驗步驟是將提取的蛋白電泳—轉膜---一抗孵育---二抗孵育---底物顯色---分析。我這幾天幾乎都在重復著這個過程,現在將自己試驗過程記錄下來,和大家一起分享,希望對新手有所幫助。1.蛋白提取傳統方法是(1)組織稱重(2)利用液氮、研缽粉碎組織塊(3)加入RIPA緩沖液,PMSF(4)勻漿(15,000轉/分*1分鐘)維持4℃(5)加入PMSF冰上孵育30分鐘,移入離心管4℃離心15分鐘(6)上清液為細胞裂解液可分裝-20℃保存。一部分進行Bradford比色法測定蛋白...

  • 2022

    7-21

    紫外線是指通過棱鏡將自然光分成赤、橙、黃、綠、青、藍、紫七色光,波長較紫色光更短的一類光線的總稱.它廣泛存在于自然界中,與人的生活密切相關。根據生物效應的不同,將紫外線按照波長劃分為四個部分:A波段(UVA),又稱為黑斑效應紫外線(400~315nm);B波段(UVB),又稱為紅斑效應紫外線(315~280nm);C波段(UVC),又稱為滅菌紫外線(280~100nm);D波段(UVD),又稱為真空紫外線(VacuumeUV)(200~10nm)。很多年之前,紫外線就已被用于...

  • 2022

    7-21

    威尼德紫外交聯儀:在Northernblotting、Southernblotting、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯、Sterilization(滅菌)、DNANicking(DNA缺失)的應用。紫外交聯技術是一種常用于材料科學和化學領域的重要技術手段。隨著材料研究的不斷深入,紫外交聯儀逐漸成為了廣泛應用的分析設備。紫外交聯儀利用紫外光對材料進行照射,通過能量的輸入和材料分子之間的相互作用,實現材料的共價鍵形成或斷裂。當紫外光照射在材料上時,光能激發材料內部的電子,使...

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